使用流式细胞术的血小板活化试验检测全血中血小板功能测量的标准化和参考范围

发布时间:2018年07月24日 来源:南宁输血医学研究所血小板免疫学网 阅读次数:

Standardization and reference ranges for whole blood platelet function measurements using a flow cytometric platelet activation test.

 

作者:Huskens, D ; Sang,Y ; Konings, J ; Roest, M ;

翻译:蒋丽红

出处:PLoS One.2018132 :e0192079

摘要:

简介:使用流式细胞术进行血小板功能检测对现有血小板功能检测如诊断出血性疾病、监测抗血小板治疗效果、输血药物和预测血栓形成等有额外的价值。主要的挑战是使用这项技术作为诊断试验。本研究的目的是标准化检测试剂盒的准备、优化和验证,并确定129名健康人群的参考值。

方法:血小板功能检测试剂包括三种激动剂和P-选择素,活化αIIbβ3和糖蛋白IbGPIb),-20℃保存待用。加入稀释的全血并通过流式细胞术检测活化标记物的密度来量化被激活的血小板。使用抗小鼠Igκ颗粒验证试验的稳定性和标准化结果,确定参考值范围。

结果:与在室温下检测结果相比,新鲜血液在室温下储存4小时后在37°C下预热/直接检测可获得稳定的结果(%CV<10%)。批内%CV<5%。将抗小鼠Igκ颗粒与储存长达12个月的抗体一起孵育亦能产生稳定的荧光。在129名个体中,P-选择素表达和αIIbβ3活化的个体差异分别在23%和37%。

结论:目前的研究有助于将基于流式细胞仪的血小板功能试验从科研工具转换为诊断试验。使用制备和储存的血小板活化试剂进行血小板功能测量,在37°C下具有重复性。参考范围可以在临床实验室得到验证,目前正在研究是否伴有出血并发症的血小板反应性低下的患者也可以被检测出来。

关键词:

流式细胞术;人类;血小板活化;血小板功能试验/方法;参考值


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