人类血小板裂解液效率、稳定性及其在哺乳动物细胞培养所需的最佳肝素浓度

发布时间:2020年04月29日 来源:南宁输血医学研究所血小板免疫学网 阅读次数:

Human platelet lysate efficiency, stability, and optimal heparin concentration required in culture of mammalian cells.

作者:Mohamed,HE;Asker,ME ;Kotb,NS;El Habab,AM;

来源:Blood Res.2020 Mar;55(1):35-43

翻译:刘金莲

摘要

背景:胎牛血清(FBS)已被用于支持哺乳动物细胞的生长和增殖数十年。由于与FBS相关的多种风险因素,已有数项试验评估FBS替代品具有相同的效率,而且风险更低。

方法:在本项研究中,由于相关的危险因素,从活化的人类血小板衍生的人血小板裂解液(HPL)作为FBS的替代品。评估了制备过程的效率,激活前后的血小板计数。测量了几种生长因子和蛋白质的浓度,以研究HPL的效率。定期研究HPL稳定性,并确定了防止各种介质中凝胶形成所需的最佳肝素浓度。通过评估Vero和Hep-2细胞系的生长性能,比较了HPL和FBS的生物学活性

结果:血小板计数测定的结果显示了HPL制备过程的效率。HPL中的生长因子浓度显著高于FBS,而HPL中的蛋白质含量低于FBS。稳定性研究数据表明,所制备的HPL在-20°C下可稳定长达15个月。在不同培养基中使用的理想肝素浓度取决于钙的浓度。细胞活力测定的结果表明,HPL在支持Vero和Hep-2细胞的生长和增殖方面优于FBS。

结论:通过血小板的机械活化制备的HPL可以作为FBS在细胞培养过程中的有效替代品。

关键词:生长因子;Hep-2细胞系;肝素;人类血小板裂解液;Vero细胞系;活力测定;





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